ForeDirect RT-qPCR komplekt
Komplekti kirjeldus:
◮RNA otseseks reaalajas amplifikatsiooniks tampoonikogudest ilma RNA puhastusprotsessideta.See komplekt lõpetab qRT-PCR tsüklid ühe tunni jooksul.Ensüümi segu on pöördtranskriptaasi, Hot-Start Taq DNA polümeraasi ja RNaasi inhibiitori optimeeritud segu.Reaktsioonipuhver sisaldab kõiki vajalikke komponente, sealhulgas optimeeritud puhvri komponente, Mg2+, dUTP ja dNTP.
Kirjeldus
ForeDirect RT-qPCR komplekt on mõeldud RNA otseseks reaalajas amplifikatsiooniks tampoonikogudest ilma RNA puhastusprotsessideta.See komplekt lõpetab qRT-PCR tsüklid ühe tunni jooksul.Ensüümi segu on pöördtranskriptaasi, Hot-Start Taq DNA polümeraasi ja RNaasi inhibiitori optimeeritud segu.Reaktsioonipuhver sisaldab kõiki vajalikke komponente, sealhulgas optimeeritud puhvri komponente, Mg2+, dUTP ja dNTP.
Tehnilised andmed
100T
Komplekti komponendid
| Nukleiinhappe vabastav aine |
| RNA kaitseaine |
| 2 × RT-qPCR puhver |
| Ensüümi segu (Taq&M-MLV) |
| Juhised |
PCR rakendus
1. Kui PCR-reaktsioonituube on korraks tsentrifuugitud, asetage need amplifikatsiooniseadme proovipaaki.
2. Termiline protokoll
| Samm | Temperatuur | Aeg | Tsüklid | |
| 1 | Pöördtranskriptsioon | 50℃ | 15 minutit | 1 |
| 2 | Eeldenatureerimine | 95℃ | 1 min | 1 |
| 3 | Denatureerimine | 95℃ | 10 sekundit | 42 |
| 4 | Anneal/Extension | 60℃ | 30 sekundit | |
Märge:Fluorestsentssignaal tuvastati kohe pärast iga tsükli pikendamisetappi.
3. Pärast seadistamist salvestage fail ja käivitage reaktsiooniprogramm.
Tööetapid
Enne reaktiivi valmistamist tuleb kõik komplektis olevad reaktiivid toatemperatuuril üles sulatada ja õrnalt segada.
Reaktiivi ettevalmistamine
1. Valmistage ette nukleiinhapete vabastamise segu
| Komponent | Maht proovi või kontrolli kohta |
| Nukleiinhappe vabastav aine | 5 μL |
| RNA kaitseaine | 0,5 μL |
2. Valmistage reaktsioonisegu
| Komponent | Maht proovi või kontrolli kohta |
| 2 × RT-qPCR puhver | 15 μL |
| Ensüümi segu (Taq&M-MLV) | 1,5 μL |
| Praimerid ja sondid | 1 μL |
Ladustamine ja säilivusaeg
-Komplekti tuleks hoida temperatuuril -20± 5℃.Kehtivusaeg on 12 kuud.
- Vältige korduvaid külmutamise-sulatamise tsükleid (<5 tsüklit).
