Animal Tissue Direct PCR komplekt-UNG (ilma proovivõtuvahenditeta) protokoll
Komplekti kirjeldus:
Kasutage loomsete kudede lüsaati otse PCR amplifikatsiooni matriitsina, ilma DNA eraldi ekstraheerimiseta, kiire ja kõrge tundlikkus.Lisatud UNG reostusvastane süsteem, et kõrvaldada valepositiivsed tulemused.
◮Ei ole vaja aeganõudvat ja kallist DNA puhastamist.
◮Proovinõudlus on väike, võtke vaid üks seeme.
◮Spetsiaalseid töötlusi, nagu lihvimine ja purustamine, pole vaja ning toiming on lihtne.
◮Optimeeritud PCR-süsteem võimaldab PCR-il olla kõrgem spetsiifilisus ja suurem tolerantsus PCR reaktsiooni inhibiitorite suhtes.
Kirjeldused
See komplekt kasutab ainulaadset lüüsipuhvri süsteemi, et kiiresti vabastada genoomne DNA loomsetest koeproovidest PCR-reaktsioonide jaoks, seega on see eriti sobiv suuremahuliseks geneetiliseks testimiseks.
Genoomse DNA lüüsipuhvrist vabastamise protsess lõpeb 10-30 minuti jooksul temperatuuril 65 °C.Muid protsesse, nagu valgu ja RNA eemaldamine, pole vaja ning vabanenud DNA jälje saab kasutada PCR reaktsiooni matriitsina.
2 × PCR lihtneTMMix (UNG) kasutab dTTP asemel dUTP-d 2×PCR Easy aluselTMSegage ja lisage UNG ensüüm (Uracil-N-glükosülaas), mis võib samal ajal lagundada dUTP-d sisaldavat matriitsi.Enne PCR reaktsiooni kasutatakse UNG ensüümi uratsiili sisaldava PCR produkti lagundamiseks.UNG ensüüm ei mõjuta uratsiili mittesisaldavale mallile, tagades seeläbi amplifikatsiooni spetsiifilisuse ja täpsuse ning vältides PCR-produktide saastumise võimalust suuremahuliste geneetiliste testide käigus.
D-Taq DNA polümeraas on Foregene poolt spetsiaalselt välja töötatud DNA polümeraas otseste PCR reaktsioonide jaoks.D-Taq DNA polümeraas talub tugevalt mitmesuguseid PCR reaktsiooni inhibiitoreid ja suudab tõhusalt amplifitseerida DNA jälgi erinevates keerukates reaktsioonisüsteemides ning amplifikatsiooni kiirus võib ulatuda 2 Kb/min, mis on eriti sobiv otseseks PCR reaktsiooniks.
Komplekti komponendid
| I osa | Puhver AL |
| Foregene proteaas | |
| 6 × DNA laadimispuhver | |
| II osa | 2 × PCR lihtneTMMix (UNG) |
Omadused ja eelised
■Ei mingit aeganõudvat ja kallist DNA puhastamist
■ Proovivajadus on väike, testida saab kõigest 5 mg loomset kudet.
■ Eritöötlust, nagu lihvimine ja purustamine, pole vaja ning toiming on lihtne.
■ Optimeeritud PCR-süsteem muudab PCR-i spetsiifilisuse ja tugevama taluvuse PCR reaktsiooni inhibiitorite suhtes.
■ Saastevastane PCR-süsteem 2×PCR lihtneTMMix (UNG) kõrvaldab tõhusalt PCR-toodetest põhjustatud saaste ning tagab võimenduse spetsiifilisuse ja täpsuse.
Komplekti parameetrid
Kasutamine: mitmesugused loomsed koed.
Proovi lüüsist vabanenud DNA: kasutatakse ainult PCR matriitsina.
Komplekti saab kasutada järgmistel eesmärkidel: transgenoosi tuvastamine, loomade genotüpiseerimine jne.
Töövoog
Ladustamine ja säilivusaeg
Selle komplekti I osa tuleks hoida 2-8℃.
Reagenti Buffer AL võib säilitada kuivades tingimustes 12 kuud;seda saab säilitada 2-8℃pikemaks ladustamiseks.
Reagendi Foregene Protease on ainulaadne valem.Selle aktiivsuse ja stabiilsuse tagamiseks hoidke seda aadressil 4℃12 kuuks.
Reaktiiv 6×DNA laadimispuhvrit saab säilitada 4℃või -20℃pikka aega.
Selle komplekti II osa tuleks hoida temperatuuril -20℃.
Reaktiiv 2×PCR lihtneTMMix (UNG), kui seda kasutatakse sageli, võib seda säilitada ka temperatuuril 4℃lühiajaliseks säilitamiseks (kasutada ära 10 päeva jooksul).
