• facebook
  • linkedin
  • Youtube
English
page_banner

Foreasy HS Taq DNA polümeraas

Foreasy HS Taq DNA polümeraasi esiletõstetud pilt
  • Foreasy HS Taq DNA polümeraas

Komplekti kirjeldus:

◮Kõrge spetsiifilisus: kõrge kuumkäivitusaktiivsusega ensüüm.

◮Kiire võimendus: 10 sek/kb.

◮Kõrge malli kohandatavus: saab kasutada kõrge tõhusaks võimendamiseksGCväärtusjamitmesugused raskesti amplifitseeritavad DNA matriitsid.

◮Tugev truudus: truudus on 6 kordaof tavaline Taq ensüüm.

võõras tugevus


Toote üksikasjad

Tootesildid

KKK

Kirjeldus

Foreasy HS Taq DNA polümeraas on uus Taq ensüüm, mida ekspresseeritakse Escherichia coli inseneribakterites geenirekombinatsiooni tehnoloogia abil.Pärast ensüümi töötlemist spetsiaalse protsessiga, see's aktiivsus inhibeeritakse enne termilist aktiveerimist, inhibeerides sellega mittespetsiifilist amplifikatsiooni, mis on põhjustatud praimerite või praimerite dimeeride mittespetsiifilisest anniilimisest madala temperatuuri tingimustes.See toode sobib väga spetsiifilise PCR React jaoksioon, M mitu x PCR, kõrge GC sisaldus (> 60%),koossekundaarne struktuurvõi muutugeva tausta genoomicsamplifikatsioon ja suuremahuline genoomicsvõimenduse tuvastamine.Ensüümil on 5' → 3' DNA polümeraasi aktiivsus ja 5' → 3' eksonukleaasi aktiivsus, kuid puudub 3' → 5' eksonukleaasi aktiivsus.

Komplekti komponendid

Komponent IM-01021 IM-01022 IM-01023
Foreasy HS Taq DNA polümeraas (5 U/μl)  5000 U (1 ml)  50 KU (10 ml)  500 KU (100 ml)
2 × Taq reaktsioonipuhver  25 ml × 5  250 ml × 5  500 ml × 25

Omadused ja eelised

- Kõrge spetsiifilisus: kõrge kuumkäivitusaktiivsusega ensüüm.

- Kiire võimendus: 10 sek/kb.

- Kõrge malli kohandatavus: saab kasutada kõrge tõhusaks võimendamiseksGCväärtusjamitmesugused raskesti amplifitseeritavad DNA matriitsid.

- Tugev truudus: truudus on 6 kordaof tavaline Taq ensüüm.

Komplekti rakendus

- Mitmesugune PCR/qPCR süsteem ja otsene PCR süsteem

- PCR amplifitseeritud DNA fragment

- DNA märk

- DNA sekveneerimine

- PCR pluss A saba

Tegevuse definitsioon

1U : ensüümi kogus, mis on vajalik 10 nmolDNAhappes lahustumatuks aineks, kasutades matriitsi/praimerina aktiveeritud lõhe sperma DNA-d, 74 °C, 30 minutit.

Reaktsiooni seisund

Temperatuur Reaktsiooniaeg Tsükli aeg
37°C 5 min 1
94°C 5 min 1
94°C 10 sekundit  40
60°C 10 sekundit

Märge:10 µL ja 20 µL süsteemide jaoks lisage võrdne kogus mineraalõli, kui termotsükleril ei ole kuumutuskaant.

PCR reaktsiooni tingimused varieeruvad olenevalt matriitsi, praimerite ja muu sarnase struktuuritingimustest.Konkreetses operatsioonis on vaja kavandada optimaalsed reaktsioonitingimused, sealhulgas anniilimistemperatuur, pikendusaeg jne, vastavalt konkreetsetele tingimustele, nagu matriitsi tüüp, sihtfragmendi suurus, amplifitseeritud fragmendi alusjärjestus ning GC sisaldus ja praimeri pikkus.

Säilitamine

-20 ± 5 °C 2 aastat või -80 °C pikaajaliseks säilitamiseks.

  • Eelmine:
  • Järgmine:

    • Ei mingeid võimendussignaale

    1. Komplektis olev Taq DNA polümeraas kaotab oma aktiivsuse komplekti ebaõige ladustamise või aegumise tõttu.
    Soovitus: Kontrollige komplekti säilitustingimusi;lisage PCR-süsteemi uuesti sobiv kogus Taq DNA polümeraasi või ostke seotud katsete jaoks uus reaalajas PCR-komplekt.

    2. DNA matriitsis on palju Taq DNA polümeraasi inhibiitoreid.
    Soovitus: puhastage mall uuesti või vähendage kasutatava malli kogust.

    3. Mg2+ kontsentratsioon ei sobi.
    Soovitus: meie pakutava 2× Real PCR segu Mg2+ kontsentratsioon on 3,5 mM.Mõnede spetsiaalsete praimerite ja mallide puhul võib Mg2+ kontsentratsioon siiski olla suurem.Seetõttu saate Mg2+ kontsentratsiooni optimeerimiseks MgCl2 otse lisada.Optimeerimiseks on soovitatav iga kord Mg2+ 0,5 mM suurendada.

    4. PCR amplifikatsiooni tingimused ei ole sobivad ja praimeri järjestus või kontsentratsioon on vale.
    Soovitus: kinnitage praimeri järjestuse õigsust ja praimer ei ole lagunenud;kui võimendussignaal ei ole hea, proovige lõõmutamistemperatuuri alandada ja praimeri kontsentratsiooni sobivalt reguleerida.

    5. Malli kogus on liiga vähe või liiga palju.
    Soovitus: viige läbi matriitsi lineariseerimise gradiendi lahjendus ja valige reaalajas PCR-eksperimendi jaoks parima PCR-efektiga matriitsi kontsentratsioon.

    NTC-l on liiga kõrge fluorestsentsi väärtus

    1. Töö käigus tekkinud reaktiivi saastumine.
    Soovitus: asendage reaalajas PCR-katsete jaoks uute reaktiividega.

    2. Saastumine toimus PCR reaktsioonisüsteemi ettevalmistamise ajal.
    Soovitus: Kasutage töö ajal vajalikke kaitsemeetmeid, näiteks: kandke latekskindaid, kasutage filtriga pipetiotsikut jne.

    3. Praimerid lagunevad ja praimerite lagunemine põhjustab mittespetsiifilist amplifikatsiooni.
    Soovitus: kasutage SDS-PAGE elektroforeesi, et tuvastada, kas praimerid on lagunenud, ja asendage need reaalajas PCR-katsete jaoks uute praimeritega.

    Praimeri dimeer või mittespetsiifiline amplifikatsioon

    1. Mg2+ kontsentratsioon ei sobi.
    Soovitus: meie pakutava 2× Real PCR EasyTM Mixi Mg2+ kontsentratsioon on 3,5 mM.Mõnede spetsiaalsete praimerite ja mallide puhul võib Mg2+ kontsentratsioon siiski olla suurem.Seetõttu saate Mg2+ kontsentratsiooni optimeerimiseks MgCl2 otse lisada.Optimeerimiseks on soovitatav iga kord Mg2+ 0,5 mM suurendada.

    2. PCR anniilimistemperatuur on liiga madal.
    Soovitus: tõstke PCR anniilimistemperatuuri iga kord 1 ℃ või 2 ℃ võrra.

    3. PCR toode on liiga pikk.
    Soovitus: reaalajas PCR toote pikkus peaks olema vahemikus 100-150 bp, mitte üle 500 bp.

    4. Praimerid lagunevad ja praimerite lagunemine toob kaasa spetsiifilise amplifikatsiooni ilmnemise.
    Soovitus: kasutage SDS-PAGE elektroforeesi, et tuvastada, kas praimerid on lagunenud, ja asendage need reaalajas PCR-katsete jaoks uute praimeritega.

    5. PCR-süsteem on vale või süsteem on liiga väike.
    Soovitus: PCR-reaktsioonisüsteem on liiga väike, mistõttu tuvastamise täpsus väheneb.Reaalaja PCR-eksperimendi taaskäivitamiseks on kõige parem kasutada kvantitatiivse PCR-instrumendi soovitatud reaktsioonisüsteemi.

    Kvantitatiivsete väärtuste halb korratavus

    1. Seade töötab valesti.
    Soovitus: Instrumendi iga PCR-ava vahel võib esineda vigu, mille tulemuseks on halb reprodutseeritavus temperatuuri juhtimise või tuvastamise ajal.Kontrollige vastavalt vastava instrumendi juhistele.

    2. Proovi puhtus ei ole hea.
    Soovitus: ebapuhtad proovid põhjustavad katse halva reprodutseeritavuse, mis hõlmab malli ja praimerite puhtust.Parim on malli uuesti puhastada ja praimereid saab kõige paremini puhastada SDS-PAGE abil.

    3. PCR-süsteemi ettevalmistamise ja säilitamise aeg on liiga pikk.
    Soovitus: kasutage reaalajas PCR-süsteemi PCR-eksperimendiks kohe pärast valmistamist ja ärge jätke seda liiga kauaks kõrvale.

    4. PCR amplifikatsiooni tingimused ei ole sobivad ja praimeri järjestus või kontsentratsioon on vale.
    Soovitus: kinnitage praimeri järjestuse õigsust ja praimer ei ole lagunenud;kui võimendussignaal ei ole hea, proovige lõõmutamistemperatuuri alandada ja praimeri kontsentratsiooni sobivalt reguleerida.

    5. PCR-süsteem on vale või süsteem on liiga väike.
    Soovitus: PCR-reaktsioonisüsteem on liiga väike, mistõttu tuvastamise täpsus väheneb.Reaalaja PCR-eksperimendi taaskäivitamiseks on kõige parem kasutada kvantitatiivse PCR-instrumendi soovitatud reaktsioonisüsteemi.

    Kirjutage oma sõnum siia ja saatke see meile

    SeotudTooted

    Otsimiseks vajutage sisestusklahvi või sulgemiseks ESC-klahvi