Viiruse DNA ja RNA eraldamise komplekt Viiruse DNA ja RNA ekstraheerimise puhastamise ettevalmistamise komplektid
Tehnilised andmed
50 ettevalmistust, 200 ettevalmistust
Viiruse RNA nukleiinhapete puhastamise ekstraheerimise isolatsioonikomplekt kasutab Foregene välja töötatud tsentrifuugimiskolonni ja valemit, mis suudab tõhusalt ekstraheerida kõrge puhtusastmega ja kvaliteetset viiruse RNA-d proovidest, nagu plasma, seerum, rakuvaba kehavedelik ja rakukultuuri supernatant.Komplekt sisaldab spetsiaalselt lineaarset akrüülamiidi, mis suudab proovidest hõlpsalt püüda väikeses koguses RNA-d.Ainult RNA-kolonn suudab RNA-d tõhusalt siduda.Komplekt suudab korraga töödelda suurt hulka proove.
Kogu komplekt ei sisalda RNaasi, seega ei lagune puhastatud RNA.Puhver viRW1 ja puhver viRW2 suudavad tagada, et saadud viiruslik nukleiinhape ei sisalda valku, nukleaasi ega muid lisandeid, mida saab kasutada otse allavoolu molekulaarbioloogia katseteks.
Komplekti komponendid
| Lineaarne akrüülamiid |
| Puhver DRL |
| Puhver RW1, puhver RW2 |
| RNaasivaba ddH2O |
| DNA/RNA kolonn |
| Juhised |
Omadused ja eelised
■ Töötamine toatemperatuuril (15-25 ℃) kogu protsessi vältel ilma jäävannita ja madalal temperatuuril tsentrifuugimiseta.
■ RNaasivaba komplekt, ei pea muretsema RNA lagunemise pärast.
■ Kõrge nukleiinhapete saagis: ainult DNA/RNA kolonn ja ainulaadne valem suudavad tõhusalt puhastada DNA-d ja RNA-d.
■ Suur proovitöötlusvõimsus: iga kord saab töödelda kuni 200 μl proove.
■ Kiire kiirus: lihtne kasutada ja saab valmis 20 minutiga.
■ Ohutus: orgaanilist reaktiivi pole vaja.
■ Kõrge kvaliteet: puhastatud RNA fragmendid on kõrge puhtusastmega, valkude ja muude lisanditeta ning sobivad erinevatele allavoolu eksperimentaalsetele rakendustele.
Komplekti rakendus
See sobib viiruse nukleiinhappe ekstraheerimiseks ja puhastamiseks proovidest, nagu plasma, seerum, rakuvaba kehavedelik ja rakukultuuri supernatant.
Töövoog
Diagramm
Ladustamine ja säilivusaeg
■ Seda komplekti saab säilitada 24 kuud kuivades tingimustes toatemperatuuril (15-25 ℃);kui seda on vaja pikemalt säilitada, võib seda säilitada temperatuuril 2–8 ℃.
■ Lineaarset akrüülamiidi lahust võib säilitada toatemperatuuril 7 päeva;pärast komplekti kättesaamist võtke see välja ja hoidke -20°C juures.
■ Pärast lineaarse akrüülamiidi lisamist puhvrile DRL võib seda säilitada temperatuuril 2–8 °C kuni 48 tundi.Palun kasutage valmislahust.
Probleemide analüüsi juhend
Järgmine on viiruse DNA/RNA ekstraheerimisel tekkida võivate probleemide analüüs, lootes olla teie katsetes abiks.Lisaks on meil spetsiaalne tehniline tugi, mis on seotud muude eksperimentaalsete või tehniliste probleemidega, välja arvatud kasutusjuhised ja probleemide analüüs.Vajaduse korral võtke meiega ühendust: 028-83360257 või e-post:
Tech@foregene.com.
Nukleiinhapete ekstraheerimine puudub või nukleiinhapete saagis on madal
Taaskasutamise efektiivsust mõjutavad tavaliselt paljud tegurid, näiteks: proovi nukleiinhappesisaldus, töömeetod, elueerimismaht jne.
Tavaliste põhjuste analüüs:
1. Protseduuri ajal viidi läbi jäävannis või madalal temperatuuril (4°C) tsentrifuugimine.
Soovitus: Töötage kogu protsessi vältel toatemperatuuril (15-25°C), ärge jäävanni ja madalal temperatuuril tsentrifuugimist.
2. Proovi on valesti hoitud või proovi säilitati liiga kaua.
Soovitus: hoida proove temperatuuril -80°C ja vältida korduvat külmutamist ja sulatamist;proovige nukleiinhapete ekstraheerimiseks kasutada värskelt kogutud proove.
3. Ebapiisav proovi lüüs.
Soovitus: veenduge, et proov ja lüüsi töölahus segatakse põhjalikult ja inkubeeritakse toatemperatuuril (15-25 °C) 10 minutit.
4. Eluendi vale lisamine.
Soovitus: Veenduge, et RNase-Free ddH2O lisatakse tilkhaaval puhastuskolonni membraani keskele ja ärge tilgutage seda puhastuskolonni rõngale.
5. Puhvrisse RW2 ei lisatud õiget kogust absoluutset etanooli.
Soovitus: järgige juhiseid, lisage puhvrile RW2 õige kogus absoluutset etanooli ja segage enne komplekti kasutamist korralikult läbi.
6. Sobimatu proovi maht.
Soovitus: iga 500 µl puhvri DRL-i kohta töödeldakse 200 µl proovi.Proovi liigne töötlemine toob kaasa madalama nukleiinhapete ekstraheerimise saagise.
7. Sobimatu elueerimismaht või mittetäielik elueerimine.
Soovitus: Puhastuskolonni eluendi maht on 30-50μl;kui elueerimisefekt ei ole rahuldav, on soovitatav pikendada pärast eelsoojendatud RNaasivaba ddH2O lisamist toatemperatuuril aega, näiteks 5-10 min.
8. Etanool jääb kolonnile pärast pesemist puhvriga RW2.
Soovitus: Kui pärast 2-minutilist tsentrifuugimist puhvriga RW2 jääb etanooli alles, võib kolonni panna pärast tsentrifuugimist 5 minutiks toatemperatuurile, et etanooli jääk täielikult eemaldada.
Puhastatud nukleiinhape laguneb
Puhastatud nukleiinhappe kvaliteet on seotud proovi säilimise, RNaasi saastumise, toimimise ja muude teguritega.Tavaliste põhjuste analüüs:
1. Kogutud proove ei ladustatud õigeaegselt.
Soovitus: Kui proovi ei kasutata õigeaegselt pärast kogumist, hoidke seda kohe -80°C juures madalal temperatuuril.RNA ekstraheerimiseks proovige kasutada värskelt kogutud proove.
2. Koguge proovid ning külmutage ja sulatage korduvalt.
Soovitus: Vältige proovide kogumise ja säilitamise ajal külmutamist ja sulatamist (mitte rohkem kui üks kord), vastasel juhul väheneb nukleiinhappe saagis.
3. Operatsiooniruumi viiakse RNaasi sisse või ei kanta ühekordseid kindaid, maske jms.
Soovitus: RNA ekstraheerimise katseid on kõige parem teha eraldi RNA operatsiooniruumis ja laborilaud tuleks enne katset puhastada.
Katse ajal kandke ühekordselt kasutatavaid kindaid ja maske, et vältida RNA lagunemist, mis on põhjustatud RNaasi sissetoomisest suurimal määral.
4. Reaktiiv oli kasutamise ajal saastunud RNaasiga.
Soovitus: Asendage seotud katsete jaoks uue viiruse DNA/RNA isolatsioonikomplektiga.
5. RNA-ga manipuleerimiseks kasutatud tsentrifuugitorud ja pipetiotsad on saastunud RNaasiga.
Soovitus: Veenduge, et RNA ekstraheerimiseks kasutatavad tsentrifuugitorud, pipetiotsad, pipetid jne on kõik RNaasivabad.
Puhastatud nukleiinhape mõjutab allavoolu katseid
Puhastuskolonniga puhastatud DNA ja RNA, kui soolaioonide ja valgu sisaldus on liiga kõrge, mõjutab see allavoolu katseid, näiteks: PCR amplifikatsioon, pöördtranskriptsioon jne.
1. Elueeritud DNA-s ja RNA-s on soolaioonide jäägid.
Soovitus: Veenduge, et puhvrile RW2 on lisatud õige kogus absoluutset etanooli, ja peske puhastuskolonni kaks korda kasutusjuhendis määratud tsentrifuugimiskiirusel;Viige läbi tsentrifuugimine, et minimeerida soolaioonide saastumist.
2. Elueeritud DNA-s ja RNA-s on etanoolijääke.
Soovitus: Pärast puhvriga RW2 pesemise kinnitamist teostage tühja toru tsentrifuugimine kasutusjuhendis toodud tsentrifuugimiskiirusel;kui etanoolijääke on endiselt olemas, võite tühja katseklaasi tsentrifuugida ja seejärel asetada see 5 minutiks toatemperatuurile, et eemaldada etanoolijäägid.
Kasutusjuhendid:
Viiruse DNA ja RNA isolatsioonikomplekti kasutusjuhend
