• facebook
  • linkedin
  • Youtube
page_banner

Reaalajas PCR Easyᵀᴹ-Taqman

Komplekti kirjeldus:

Lihtne – 2× PCR Mix, et vähendada katseviga ja tööaega

Spetsiifiline optimeeritud puhver ja kuumkäivitusega Taq ensüüm võivad takistada mittespetsiifilist amplifikatsiooni ja praimeri dimeeri moodustumist

Kõrge tundlikkus – suudab tuvastada madalaid mallikoopiaid

Hea mitmekülgsus – ühildub enamiku reaalajas kvantitatiivsete PCR-seadmetega

võõras tugevus


Toote üksikasjad

Tootesildid

KKK

Komplekti kirjeldused

2X Real PCR EasyTMMix-Taqmani pakub Real Time PCR EasyTM-Taqmani komplekt on uus eelsegusüsteem, mis kasutab reaalajas PCR amplifikatsioonireaktsioonide jaoks spetsiifilisi fluorestseeruvaid sonde, mis võivad oluliselt parandada toote spetsiifilisust ja reaktsioonitundlikkust.ROX on saadaval sisekontrollivärvina.

2X tõeline PCR lihtneTMMix-Taqman sisaldab Foregene ainulaadset kuumkäivitusega Taq DNA polümeraasi.Võrreldes tavaliste Taq ensüümidega on selle eeliseks kõrge amplifikatsioonitõhusus, tugev spetsiifiline võimendusvõime ja madal mittevastavus.See võib vähendada mittespetsiifilist amplifikatsiooni ja parandada PCR täpsust.

Tehnilised andmed

Reaalajas PCR lihtneTM- Taqman

Komplekti koostis (20 μl süsteem)

QP-01021

QP-01022

QP-01023

QP-01024

200T

500T

1000T

2000T

Tõeline PCRLihtneTMSega- Taqman

1 ml ×2

1.7 ml ×3

1.7 ml ×6

1.7 ml ×12

20×ROX-i võrdlusvärv

200 μl

0.5ml

1 ml

1 ml × 2

DNaasivaba ddH2O

1,7 ml

1.7 ml ×2

10 ml

20 ml

Ijuhend

1

1

1

1

Omadused ja eelised

■ Lihtne – 2X PCR Mix, et vähendada katseviga ja tööaega

■ Spetsiifiline – optimeeritud puhver ja kuumkäivitusega Taq ensüüm võivad takistada mittespetsiifilist amplifikatsiooni ja praimeri dimeeri moodustumist

■ Kõrge tundlikkus – suudab tuvastada madalaid mallikoopiaid

■ Hea mitmekülgsus – ühildub enamiku reaalajas kvantitatiivsete PCR-seadmetega

Komplekti rakendus

qPCR analüüs

Töövoog

RT PCR-Taqman
RT PCR-Taqmani graafik

Graafika

Ladustamine ja säilivusaeg

Seda komplekti tuleb hoida valguse eest kaitstult ja hoida temperatuuril -20 ℃.Kui seda kasutatakse sageli, võib seda ka lühikest aega (10 päeva) hoida temperatuuril 4 ℃.


  • Eelmine:
  • Järgmine:

  • Ei mingeid võimendussignaale

    1. Komplektis olev Taq DNA polümeraas kaotab oma aktiivsuse komplekti ebaõige ladustamise või aegumise tõttu.
    Soovitus: Kontrollige komplekti säilitustingimusi;lisage PCR-süsteemi uuesti sobiv kogus Taq DNA polümeraasi või ostke seotud katsete jaoks uus reaalajas PCR-komplekt.

    2. DNA matriitsis on palju Taq DNA polümeraasi inhibiitoreid.
    Soovitus: puhastage mall uuesti või vähendage kasutatava malli kogust.

    3. Mg2+ kontsentratsioon ei sobi.
    Soovitus: meie pakutava 2× Real PCR segu Mg2+ kontsentratsioon on 3,5 mM.Mõnede spetsiaalsete praimerite ja mallide puhul võib Mg2+ kontsentratsioon siiski olla suurem.Seetõttu saate Mg2+ kontsentratsiooni optimeerimiseks MgCl2 otse lisada.Optimeerimiseks on soovitatav iga kord Mg2+ 0,5 mM suurendada.

    4. PCR amplifikatsiooni tingimused ei ole sobivad ja praimeri järjestus või kontsentratsioon on vale.
    Soovitus: kinnitage praimeri järjestuse õigsust ja praimer ei ole lagunenud;kui võimendussignaal ei ole hea, proovige lõõmutamistemperatuuri alandada ja praimeri kontsentratsiooni sobivalt reguleerida.

    5. Malli kogus on liiga vähe või liiga palju.
    Soovitus: viige läbi matriitsi lineariseerimise gradiendi lahjendus ja valige reaalajas PCR-eksperimendi jaoks parima PCR-efektiga matriitsi kontsentratsioon.

    NTC-l on liiga kõrge fluorestsentsi väärtus

    1. Töö käigus tekkinud reaktiivi saastumine.
    Soovitus: asendage reaalajas PCR-katsete jaoks uute reaktiividega.

    2. Saastumine toimus PCR reaktsioonisüsteemi ettevalmistamise ajal.
    Soovitus: Kasutage töö ajal vajalikke kaitsemeetmeid, näiteks: kandke latekskindaid, kasutage filtriga pipetiotsikut jne.

    3. Praimerid lagunevad ja praimerite lagunemine põhjustab mittespetsiifilist amplifikatsiooni.
    Soovitus: kasutage SDS-PAGE elektroforeesi, et tuvastada, kas praimerid on lagunenud, ja asendage need reaalajas PCR-katsete jaoks uute praimeritega.

    Praimeri dimeer või mittespetsiifiline amplifikatsioon

    1. Mg2+ kontsentratsioon ei sobi.
    Soovitus: meie pakutava 2× Real PCR EasyTM Mixi Mg2+ kontsentratsioon on 3,5 mM.Mõnede spetsiaalsete praimerite ja mallide puhul võib Mg2+ kontsentratsioon siiski olla suurem.Seetõttu saate Mg2+ kontsentratsiooni optimeerimiseks MgCl2 otse lisada.Optimeerimiseks on soovitatav iga kord Mg2+ 0,5 mM suurendada.

    2. PCR anniilimistemperatuur on liiga madal.
    Soovitus: tõstke PCR anniilimistemperatuuri iga kord 1 ℃ või 2 ℃ võrra.

    3. PCR toode on liiga pikk.
    Soovitus: reaalajas PCR toote pikkus peaks olema vahemikus 100-150 bp, mitte üle 500 bp.

    4. Praimerid lagunevad ja praimerite lagunemine toob kaasa spetsiifilise amplifikatsiooni ilmnemise.
    Soovitus: kasutage SDS-PAGE elektroforeesi, et tuvastada, kas praimerid on lagunenud, ja asendage need reaalajas PCR-katsete jaoks uute praimeritega.

    5. PCR-süsteem on vale või süsteem on liiga väike.
    Soovitus: PCR-reaktsioonisüsteem on liiga väike, mistõttu tuvastamise täpsus väheneb.Reaalaja PCR-eksperimendi taaskäivitamiseks on kõige parem kasutada kvantitatiivse PCR-instrumendi soovitatud reaktsioonisüsteemi.

    Kvantitatiivsete väärtuste halb korratavus

    1. Seade töötab valesti.
    Soovitus: Instrumendi iga PCR-ava vahel võib esineda vigu, mille tulemuseks on halb reprodutseeritavus temperatuuri juhtimise või tuvastamise ajal.Kontrollige vastavalt vastava instrumendi juhistele.

    2. Proovi puhtus ei ole hea.
    Soovitus: ebapuhtad proovid põhjustavad katse halva reprodutseeritavuse, mis hõlmab malli ja praimerite puhtust.Parim on malli uuesti puhastada ja praimereid saab kõige paremini puhastada SDS-PAGE abil.

    3. PCR-süsteemi ettevalmistamise ja säilitamise aeg on liiga pikk.
    Soovitus: kasutage reaalajas PCR-süsteemi PCR-eksperimendiks kohe pärast valmistamist ja ärge jätke seda liiga kauaks kõrvale.

    4. PCR amplifikatsiooni tingimused ei ole sobivad ja praimeri järjestus või kontsentratsioon on vale.
    Soovitus: kinnitage praimeri järjestuse õigsust ja praimer ei ole lagunenud;kui võimendussignaal ei ole hea, proovige lõõmutamistemperatuuri alandada ja praimeri kontsentratsiooni sobivalt reguleerida.

    5. PCR-süsteem on vale või süsteem on liiga väike.
    Soovitus: PCR-reaktsioonisüsteem on liiga väike, mistõttu tuvastamise täpsus väheneb.Reaalaja PCR-eksperimendi taaskäivitamiseks on kõige parem kasutada kvantitatiivse PCR-instrumendi soovitatud reaktsioonisüsteemi.

    Kirjutage oma sõnum siia ja saatke see meile