lepingust kinni pidama”, vastab turunõuetele, liitub oma hea kvaliteediga turukonkurentsist ning pakub klientidele terviklikumat ja suurepärast tuge, et neil oleks suur võitja.Ettevõtte tegevus on kindlasti klientide rõõm Hiina uue toote enim müüdud viirusliku DNA ja Rna ekstraktsioonikomplekti jaoks. Oleme laiendanud oma äritegevust Saksamaale, Türki, Kanadasse, USA-sse, Indoneesiasse, Indiasse, Nigeeriasse, Brasiiliasse ja mõnesse muusse maailma piirkonda.Teeme kõvasti tööd, et olla üks parimaid ülemaailmseid tarnijaid.
lepingust kinni pidama”, vastab turunõuetele, liitub oma hea kvaliteediga turukonkurentsist ning pakub klientidele terviklikumat ja suurepärast tuge, et neil oleks suur võitja.Ettevõttega tegelemine on kindlasti klientide rõõmHiina Rna ja DNA ekstraheerimise komplekt ja nukleiinhappe ekstraheerimine, Ootame teiega vastastikku kasuliku suhte loomist, mis põhineb meie kvaliteetsetel toodetel ja lahendustel, mõistlikel hindadel ja parimal teenindusel.Loodame, et meie tooted toovad teile meeldiva elamuse ja kannavad endas ilutunnet.
Kasutusjuhendid:Plant Total RNA Isolation Kit Plus kasutusjuhend

lepingust kinni pidama”, vastab turunõuetele, liitub oma hea kvaliteediga turukonkurentsist ning pakub klientidele terviklikumat ja suurepärast tuge, et neil oleks suur võitja.Ettevõtte tegevus on kindlasti klientide rõõm Hiina uue toote enim müüdud viirusliku DNA ja Rna ekstraktsioonikomplekti jaoks. Oleme laiendanud oma äritegevust Saksamaale, Türki, Kanadasse, USA-sse, Indoneesiasse, Indiasse, Nigeeriasse, Brasiiliasse ja mõnesse muusse maailma piirkonda.Teeme kõvasti tööd, et olla üks parimaid ülemaailmseid tarnijaid.
Hiina uus toode Hiina Rna ja DNA ekstraheerimise komplekt ja nukleiinhapete ekstraheerimine. Ootame teiega vastastikku kasuliku suhte loomist, mis põhineb meie kvaliteetsetel toodetel ja lahendustel, mõistlikel hindadel ja parimal teenindusel.Loodame, et meie tooted toovad teile meeldiva elamuse ja kannavad endas ilutunnet.

Kolonn kinni

Pärast kolonni ummistumist väheneb RNA saagis või on RNA puhastamine isegi võimatu ja saadud RNA mass on väike.

Üldise põhjuse analüüs:

1. Proovipausid ei ole põhjalikud.

Proovi purunemine ei põhjusta DNA PUHASTAMISVEERUNI täielikku blokeerimist, mõjutades samal ajal RNA saagist ja kvaliteeti.Proovide purustamisel soovitame kiiresti jahvatada piisavas koguses vedelas lämmastikus. Proovige proovi rakusein, rakumembraan ja muud kuded purustada.Polüoolpolüsahhariidide taimeproovide puhul soovitame kasutada Plant Total RNA ISOLATION KIT PLUS.

2. Eraldatud proovi supernatandi imemisel DNA-puhastuskolonniga võib võimalikku raku fragmenteeritud sadet sisse hingata.

Võetud raku killustatud setted põhjustavad ONLY-RNA-kolonni, mis blokeeritakse, kui RNA adsorptsioonioperatsioon sooritatakse (vt 6. sammu).Soovitame teil seda supernatanti imeda hoolikalt, et vältida rakujäätmete imemist.

3. Proovi esialgne kogus on liiga palju.

Proovi liigne kasutamine põhjustab proovi mittetäieliku fragmenteerumise või rakkude mittetäieliku lüüsi puhvriga PSL1, mille tulemuseks on puhastuskolonni blokeerimine puhastamise ajal.Plant Total RNA isolation Kit Iga üksik puhastatud tööproov on 50 mg.Polüoolpolüsahhariidide taimeproovide puhul soovitame proovida Plant Total RNA ISOLATION KIT PLUS.

4. Tsentrifuugi temperatuur on liiga madal.

Kogu RNA eraldamise ja puhastamise protsess viiakse läbi toatemperatuuril (20-25°C), välja arvatud see, et proovi kude purustatakse vedela lämmastiku toimel. Mõne krüogeense tsentrifuugi temperatuur on madalam kui 20℃, mis võib põhjustada DNA-puhastuskolonni ja/või ainult RNA-d sisaldava kolonni blokeerimist.Kui see juhtub, seadke tsentrifuugi temperatuur 20–25 kraadini℃javeenduge, et lüüsisegu ja/või etanooliga lisatud supernatant oleks eelsoojendatud temperatuurini 37°C.

RNA-d ei ekstraheerita või RNA saagis on madal

Taaskasutamise efektiivsust mõjutavad tavaliselt paljud tegurid, näiteks: proovi RNA sisaldus, töömeetod, elueerimismaht jne.

Levinud põhjuste analüüs järgmiselt:

1. Operatsiooni ajal viidi läbi jäävannis või madalal temperatuuril (4°C) tsentrifuugimine.

Soovitus: Töötage toatemperatuuril (15-25°C) kogu protsessi jooksul ärge tehke jäävanni ja madalal temperatuuril tsentrifuugimist.

2. RNA on lagunenud proovi ebaõige säilitamise või proovi pikaajalise säilitamise tõttu.

Soovitus: Värskelt kogutud proovid tuleb kiiresti külmutada vedelas lämmastikus ja seejärel säilitada -80°C juures pikka aega, vältida proovide korduvat külmutamist ja ülessulatamist;või leotada proove kohe RNA stabilisaatori RNAlater lahuses (loomproovid).

3. Proovi ebapiisav killustumine ja lüüs põhjustavad puhastuskolonni blokeerimise.

Soovitus: Koe jahvatamisel veenduge, et kude oleks piisavalt jahvatatud, ja viige see kiiresti eelnevalt ettevalmistatud puhvrisse PSL1 (kinnitage, et β-ME on lisatud õiges vahekorras, vt protseduuri 1. sammu).

4.Eluent lisati valesti.

Soovitus: Veenduge, et RNaasivaba ddH2O tilgutatakse puhastuskolonni membraani keskele.

5. Puhvrisse PSL2 või puhvrisse PRW2 ei lisatud õiget kogust absoluutset etanooli.

Soovitus: järgige juhiseid, lisage puhvrile PSL2 ja puhvrile PRW2 õige kogus absoluutset etanooli ning segage enne komplekti kasutamist korralikult läbi.

6. Koeproovi kogus on sobimatu.

Soovitus: Kasutage 50 mg kudet 500 μl puhvri PSL1 kohta.Liiga suure koe kasutamine vähendab ekstraheeritud RNA kogust ja samuti väheneb saadud RNA puhtus.Soovitame tungivalt, et proovi esialgne annus ei ületaks 50 mg RNA ekstraheerimisoperatsiooni kohta.

7.Sobimatu elueerimismaht või mittetäielik elueerimine.

Soovitus: Puhastuskolonni eluendi maht on 50-200 μl;kui elueerimisefekt ei ole rahuldav, on soovitatav pikendada pärast eelsoojendatud RNaasivaba ddH2O lisamist toatemperatuuril aega, näiteks 5-10 min.

8. Puhastuskolonnis on pärast puhvriga PRW2 pesemist etanoolijääk.

Soovitus: Kui tühja katsutit tsentrifuugitakse 1 minut ja pärast pesemist puhvris PRW2 on alles etanooli, võite tühja katseklaasi tsentrifuugimise aega pikendada 2 minutini või asetada puhastuskolonn 5 minutiks toatemperatuurile, et jääk-etanooli täielikult eemaldada.

9.Komplekti kasutati valesti.

Soovitus: polüfenoolsete polüsahhariidide taimeproovide puhul ei pruugi olla võimalik saada ideaalseid RNA proove, kasutades tavalisi komplekte, nagu Plant Total RNA Isolation Kit.Soovitame teil kasutada Plant Total RNA IsolationKit Plus, mis on spetsiaalselt loodud polüfenoolsete polüsahhariidide taimeproovide jaoks.Komplekt, mis on spetsiaalselt välja töötatud RNA ekstraheerimiseks polüfenoolide ja polüsahhariidide taimeproovidest.

OD260/OD280 väärtus on madal

RNA elueerimine ddH2O-ga ja seda kasutatakse spektrofotomeetri näitude jaoks annab madalad OD260/OD280 väärtused.Suhteliselt õigete OD260/OD280 väärtuste saamiseks soovitame kasutada 10 mM Tris-HCl, pH 7,5 (rnaasivaba ddH2O asemel RNA elueerimiseks), vt „RNA kontsentratsiooni ja puhastamise analüüsid” lk 19.

Puhastatud RNA laguneb

Puhastatud RNA kvaliteet on seotud selliste teguritega nagu proovide säilitamine, RNaasi saastumine ja manipuleerimine.

Tavaliste põhjuste analüüs:

1. Koeproove ei säilitatud õigeaegselt pärast kogumist.

Soovitus: Kui koeproove ei kasutata õigeaegselt pärast kogumist, hoidke neid kohe madalal temperatuuril vedelas lämmastikus või viige need pärast kiirkülmutamist vedelas lämmastikus pikaajaliseks säilitamiseks temperatuurini -80°C või kastke proovid kohe RNA stabilisaatori RNAlater lahusesse (loomaproovid).RNA ekstraheerimiseks proovige kasutada värskelt kogutud koeproove.

2.Koeproovide korduv külmutamine ja sulatamine.

Soovitus: Koeproovide säilitamisel on parem lõigata need säilitamiseks väikesteks tükkideks ja kasutamisel osa neist välja võtta, et vältida proovide korduvast külmutamisest ja sulatamisest põhjustatud RNA lagunemist.

3. Operatsiooniruumis võetakse kasutusele RNaasi või ei kanta ühekordseid kindaid, maske jne.

Soovitus: RNA ekstraheerimise katseid on kõige parem teha eraldi RNA operatsioonidena ning laborilaud tuleks enne katset puhastada ning katse ajal kanda ühekordseid kindaid ja maske, et vältida RNA degradeerumist, mis on põhjustatud RNaasi sissetoomisest suurimal määral.

4. Reaktiiv on kasutamise ajal saastunud RNaasiga.

Soovitus: Asendage seotud katsete jaoks uue taime kogu RNA ekstraheerimise komplektidega.

5. RNA-ga manipuleerimiseks kasutatud tsentrifuugitorud ja pipetiotsad on saastunud RNaasiga.

Soovitus: Veenduge, et RNA ekstraheerimisel kasutatavad tsentrifuugitorud, pipetiotsad, pipetid jne on kõik RNaasivabad.

Kasutusjuhendid:

Plant Total RNA Isolation Kit Plus kasutusjuhend