Hiina tootja puhastamata proovi jaoks mõeldud 2-kordse kontsentreeritud eelsegu jaoks reaalajas kvantitatiivne PCR otsemultiplekssond Qpcr Mix Plus U
Organisatsioon järgib protseduuri kontseptsiooni "teaduslik juhtimine, kõrge kvaliteedi ja tõhususe ülimuslikkus, ostja kõrgeim Hiina Tootja 2-kordse kontsentreeritud eelsegu jaoks puhastamata proovi jaoks reaalajas kvantitatiivne PCR otsemultiplekssond Qpcr Mix Plus U. Meie äri on pühendunud klientidele märkimisväärsete ja turvaliste tippkvaliteediga toodete pakkumisele iga kliendi agressiivse hinnaga, tehes igale kliendile meelepäraseid teenuseid.
Organisatsioon järgib protseduuri kontseptsiooni "teaduslik juhtimine, kõrge kvaliteedi ja tõhususe ülimuslikkus, ostja kõrgeim.Hiina Taq DNA polümeraas ja Qpcr, Meie ettevõttel on palju jõudu ja stabiilne ja täiuslik müügivõrgu süsteem.Soovime, et saaksime vastastikuse kasu alusel luua usaldusväärsed ärisuhted kõigi kodu- ja välismaiste klientidega.
Reaalajas PCR praimeri kujundamise põhimõtted
Forward Primer ja Reverse Primer
Real Time PCR jaoks on praimeri disain väga oluline.Praimerid on seotud PCR amplifikatsiooni spetsiifilisuse ja efektiivsusega ning neid saab kujundada järgmiste põhimõtete alusel:
- Praimeri pikkus: 18-30 bp.
- GC sisaldus: 40-60%.
- Tm väärtus: Praimeri disainitarkvara, näiteks Primer 5, võib anda praimeri Tm väärtuse.Üles- ja allavoolu praimerite Tm väärtused peaksid olema võimalikult lähedased.Kasutada võib ka Tm arvutamise valemit: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).PCR-i läbiviimisel valitakse tavaliselt anniilimistemperatuuriks temperatuur, mis on madalam kui praimeri Tm väärtus 5 °C (vastav anniilimistemperatuuri tõus võib suurendada PCR-reaktsiooni spetsiifilisust).
- Praimerid ja PCR-tooted:
- Disainpraimeri PCR amplifikatsiooniprodukti pikkus on eelistatavalt 100-150 bp.
- Kujunduskruntide kasutamist malli teiseses struktuuripiirkonnas tuleks võimalikult palju vältida.
- Vältige 2 või enama komplementaarse aluse moodustumist ülesvoolu ja allavoolu praimerite 3'-otste vahel.
- Krundi 3′ klemmipõhja ei saa olla koos 3 täiendava järjestikuse G või C-ga.
- Praimeritel endil ei saa olla komplementaarseid struktuure, vastasel juhul moodustub juuksenõelastruktuur, mis mõjutab PCR amplifikatsiooni.
- ATCG tuleks praimeri järjestuses jaotada võimalikult ühtlaselt ja 3'-terminaalset alust tuleks vältida kui T.
Lisa1:Cell OtseneRT-qPCR Komplekti komponentt lisapakk
1. Rakkude lüüsi lahus
Rakkude lüüsi lahus | |||
Komplekti komponendid (24 süvendiga lüüsisüsteem / kaev) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
100 T | 500 T | ||
osaI | Puhver CL | 20 ml | 100 ml |
Foregene Protease Plus II | 400 μl | 1 ml × 2 | |
Puhver ST | 1 ml × 2 | 10 ml | |
osaII | DNA kustutuskumm | 400 μl | 1 ml × 2 |
RT Mix | |
Komplekti komponendid (20 μl reaktsioonisüsteem) | DRT-01011-B1 |
200 T | |
5× Direct RT Mix | 800 μl |
RNaasivaba ddH2O | 1,7 ml × 2 |
qPCR segu | ||
Komplekti komponendid (20 μl reaktsioonisüsteem) | DRT-01021-C1 | DRT-01021-C2 |
200 T | 1000 T | |
2× Direct qPCR Mix-Taqman | 1 ml × 2 | 1,7 ml × 6 |
20× ROX-i võrdlusvärv | 40 μl | 200 μl |
RNaasivaba ddH2O | 1,7 ml | 10 ml |
Organisatsioon järgib protseduuri kontseptsiooni "teaduslik juhtimine, kõrge kvaliteedi ja tõhususe ülimuslikkus, ostja kõrgeim Hiina Tootja 2-kordse kontsentreeritud eelsegu jaoks puhastamata proovi jaoks reaalajas kvantitatiivne PCR otsemultiplekssond Qpcr Mix Plus U. Meie äri on pühendunud klientidele märkimisväärsete ja turvaliste tippkvaliteediga toodete pakkumisele iga kliendi agressiivse hinnaga, tehes igale kliendile meelepäraseid teenuseid.
Hiina tootjaHiina Taq DNA polümeraas ja Qpcr, Meie ettevõttel on palju jõudu ja stabiilne ja täiuslik müügivõrgu süsteem.Soovime, et saaksime vastastikuse kasu alusel luua usaldusväärsed ärisuhted kõigi kodu- ja välismaiste klientidega.
Reaalajas PCR praimeri kujundamise põhimõtted
Forward Primer ja Reverse Primer
Real Time PCR jaoks on praimeri disain väga oluline.Praimerid on seotud PCR amplifikatsiooni spetsiifilisuse ja efektiivsusega ning neid saab kujundada järgmiste põhimõtete alusel:
- Praimeri pikkus: 18-30 bp.
- GC sisaldus: 40-60%.
- Tm väärtus: Praimeri disainitarkvara, näiteks Primer 5, võib anda praimeri Tm väärtuse.Üles- ja allavoolu praimerite Tm väärtused peaksid olema võimalikult lähedased.Kasutada võib ka Tm arvutamise valemit: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).PCR-i läbiviimisel valitakse tavaliselt anniilimistemperatuuriks temperatuur, mis on madalam kui praimeri Tm väärtus 5 °C (vastav anniilimistemperatuuri tõus võib suurendada PCR-reaktsiooni spetsiifilisust).
- Praimerid ja PCR-tooted:
- Disainpraimeri PCR amplifikatsiooniprodukti pikkus on eelistatavalt 100-150 bp.
- Kujunduskruntide kasutamist malli teiseses struktuuripiirkonnas tuleks võimalikult palju vältida.
- Vältige 2 või enama komplementaarse aluse moodustumist ülesvoolu ja allavoolu praimerite 3'-otste vahel.
- Krundi 3′ klemmipõhja ei saa olla koos 3 täiendava järjestikuse G või C-ga.
- Praimeritel endil ei saa olla komplementaarseid struktuure, vastasel juhul moodustub juuksenõelastruktuur, mis mõjutab PCR amplifikatsiooni.
- ATCG tuleks praimeri järjestuses jaotada võimalikult ühtlaselt ja 3'-terminaalset alust tuleks vältida kui T.
Lisa1:Cell OtseneRT-qPCR Komplekti komponentt lisapakk
1. Rakkude lüüsi lahus
Rakkude lüüsi lahus | |||
Komplekti komponendid (24 süvendiga lüüsisüsteem / kaev) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
100 T | 500 T | ||
osaI | Puhver CL | 20 ml | 100 ml |
Foregene Protease Plus II | 400 μl | 1 ml × 2 | |
Puhver ST | 1 ml × 2 | 10 ml | |
osaII | DNA kustutuskumm | 400 μl | 1 ml × 2 |
RT Mix | |
Komplekti komponendid (20 μl reaktsioonisüsteem) | DRT-01011-B1 |
200 T | |
5× Direct RT Mix | 800 μl |
RNaasivaba ddH2O | 1,7 ml × 2 |
qPCR segu | ||
Komplekti komponendid (20 μl reaktsioonisüsteem) | DRT-01021-C1 | DRT-01021-C2 |
200 T | 1000 T | |
2× Direct qPCR Mix-Taqman | 1 ml × 2 | 1,7 ml × 6 |
20× ROX-i võrdlusvärv | 40 μl | 200 μl |
RNaasivaba ddH2O | 1,7 ml | 10 ml |
Kasutusjuhendid: