PCR-meetodid ja nukleiinhapete aerosoolsaaste nukleiinhapete testimise laborites on nagu mündi kaks külge.Me saame ainult valida, kas see on või mitte, kuid me ei saa valida, kas tahame seda või kulutame.

1. DNA eemaldaja sõelumine

Nukleiinhappe aerosoolsaaste ruumilise eemaldamise saavutamiseks on vaja esmalt välja sõeluda DNA eemaldajad, mis suudavad eemaldada nukleiinhappeid vedelas olekus.Sest pole palju DNA-eemaldajaid, mis tõesti töötavad.Katsemeetodi kohta vaadake: DNA eemaldaja ei saa olla labori "salanurk"!

Selles katses segati võrdsetes kogustes 100 koopiat/μL (CT ligikaudu 31) ASFV plasmiidi ja DNA eemaldajat, mis olid kvantifitseeritud digitaalse PCR abil, ja seejärel reageeriti toatemperatuuril vastavalt 10 minutit, 20 minutit ja 30 minutit.Pärast nukleiinhappe ekstraheerimist viidi läbi qPCR amplifikatsioon.Võrreldi plasmiidi ja veega segatud positiivset kontrolli.Kuna katset ei lõpetatud samal ajal, võib tulemuste vahel esineda teatud hälve, kuid see ei mõjuta katse lõppu.Siiani olen hinnanud 10 kaubanduslikku DNA eemaldaja toodet.Ainult tooted nr 1, nr 6 ja nr 8 suudavad vedelas olekus plasmiidset DNA-d tõhusalt lagundada.Teistel toodetel pole peaaegu mingit mõju.

Tabel 1 Kaubanduslikult saadava DNA eemaldaja nukleiinhappe eemaldamise toime

2. Üldkasutatavate desinfektsioonivahendite DNA eemaldamise efekti katse

1. Üldkasutatavate desinfektsioonivahendite sõelumine

Laborites kasutatakse tavaliselt mitut tüüpi desinfektsioonivahendeid: aldehüüdid, fenoolid, alkoholid, kvaternaarsed ammooniumisoolad, peroksiidid, klooripreparaadid ning happed ja alused.Nende desinfektsioonivahendite desinfitseerimismõju mikroorganismidele on katsetega täielikult tõestatud, kuid nukleiinhapete lagundava toime kohta puuduvad piisavad eksperimentaalsed andmed.Nukleiinhapete testimise laborid vajavad desinfitseerivat vahendit, millel pole mitte ainult hea mikroorganisme desinfitseeriv toime, vaid mis võib lagundada ka DNA-d.Katsetulemused näitavad, et nõuetele vastavad vaid kaks klooripreparaati 84 desinfektsioonivahendist ja trikloroisotsüanuurhappest ning 1 M soolhappest.Kuna 1 M vesinikkloriidhape on tugevalt söövitav, on nukleiinhapete testimise laborites soovitatav kasutada klooripreparaate jäätmete kõrvaldamiseks.Klooripreparaadid on aga metalle söövitavad ning neid ei saa kasutada instrumentide ja seadmete desinfitseerimiseks.

Tabel 2 Erinevat tüüpi desinfektsioonivahendite DNA eemaldamise mõjud

2. Klooripreparaatide minimaalne efektiivne kontsentratsioon

Klooripõhistel desinfitseerimisvahenditel on tugev DNA-d lagundav toime, kuid nende metallide söövitamise ja ärrituse tõttu saab neid kasutada põranda, mittemetallist tööpindade, leotusotsikute, tsentrifuugitorude ja muude katseesemete puhastamiseks.

Vastavalt "Uutele koronaarkopsupõletike epideemia desinfitseerimise tehnilistele juhenditele": Saasteained (patsientide veri, eritised ja okse) saadaval kloor 5g/L-10g/L kloori sisaldav desinfektsioonivahend;põrandad, seinad ja esemepinnad kasutavad olemasolevat kloori 1g/l Kloori desinfektsioonivahendit: riideid, voodipesu ja muid tekstiile leotatakse esmalt 30 minutit 0,5g/l klooriga desinfitseerimisvahendis ja seejärel puhastatakse nagu tavaliselt.

Tabel 3 kloori desinfektsioonivahendi erinevate kontsentratsioonide DNA eemaldamise efekt

Katsetulemused näitavad, et: kui efektiivne kloori kontsentratsioon on suurem või võrdne 1,2 g/l, võib kloori sisaldav desinfitseerimisvahend 5 minuti jooksul 100 koopiat/μL plasmiidi täielikult lagundada.10 minuti jooksul toimides võib 84 desinfektsioonivahend, mille efektiivne kloorikontsentratsioon on suurem või võrdne 0,6 g/l, lagundada täielikult 100 koopiat/μL plasmiide.

3. Nukleiinhappeaerosooliga saastatud õhu eemaldamise katse

Kuidas puhastada nukleiinhapete aerosoolidest saastunud õhku?Enamik mõtteid on luua aerosooliga saastunud keskkond ja seejärel see puhastada või puhastada nukleiinhapped pärast saastumist.Minu jaoks on katse, mida ei saa korrata ja katse tulemusi kvantitatiivselt analüüsida, mõttetu, seega laenasin mõned desinfitseeriva õhu desinfitseerimise meetodid.Vt "GB27948-2020 Üldnõuded õhu desinfektsioonivahenditele" ja "Desinfitseerimise tehnilised kirjeldused"

1. Katsematerjalid

1.1 DNA eemaldaja: selles katses valiti välja kaks kaubanduslikult saadavat DNA eemaldajat 6 ja 8 tabelis 1.

1.2 Testitav plasmiid: Arvestades, et enamiku laboratoorsete saasteainete CT väärtus on suurem kui 30, on seekord kasutatud ASFV geeniplasmiidi kontsentratsioon umbes 100 koopiat/μL ja fluorestseeruv kvantitatiivne PCR CT on umbes 31.07.Lisage plasmiid flokeerivale vatitampoonile ja kuivatage õhu käes.

1.3 Testimisseade: Bilingkehan KVBOX desinfitseerimisseade, mida lahkelt toetab Shenzhen Runlian Environmental Technology Co., Ltd., on suurepärase õhu desinfitseerimisega vesinikperoksiidi desinfitseerimisvahendiga ning suudab tõhusalt tappa eoseid ja muid mikroorganisme.

1.4 Testiruum: suletud ülekandeaken umbes 0,1 kuupmeetrit.

2. Katsemeetod

Desinfitseerimismasinale seatud desinfitseerimisvahendi kogus on 10 ml ja kontsentratsioon 100 ml/m3, mis on palju suurem kui "GB27948-2020 Üldnõuded õhudesinfektsioonivahenditele": aerosoolpihustusdesinfitseerimise kasutamisel peaks desinfitseerimisvahendi kogus olema ≤10 ml/m3.