-
PCR, mitmekordne PCR, in situ PCR, pöörd-PCR, RT-PCR, qPCR(1)– PCR
PCR, mitmik-PCR, in situ PCR, pöörd-PCR, RT-PCR, qPCR(1)– PCR Lahendame erinevate PCR-ide kontseptsioonid, etapid ja üksikasjad Ⅰ.PCR polümeraasi ahelreaktsioon, mida nimetatakse PCR-iks, on molekulaarbioloogiline tehnoloogia, mida kasutatakse spetsiifiliste DNA fragmentide suurendamiseks.Seda võib pidada...Loe rohkem -
qRT-PCR eksperimentaalne põhimõte
RT-qPCR on välja töötatud tavalisest PCR-tehnoloogiast.See lisab fluorestseeruvad kemikaalid (fluorestseeruvad värvained või fluorestseeruvad sondid) traditsioonilisele PCR-reaktsioonisüsteemile ning tuvastab PCR-i lõõmutamise ja pikendamise protsessi reaalajas vastavalt nende erinevatele luminestsentsmehhanismidele.Fluorestseeruv signaal...Loe rohkem -
RT-PCR eksperimentaalse reaktsioonisüsteemi optimeerimise meetodi üksikasjalik kokkuvõte
Ⅰ.Suurendage reaktsioonisüsteemi tundlikkust: 1. Eraldage kõrge kvaliteediga RNA: edukas cDNA süntees pärineb kvaliteetsest RNA-st.Kvaliteetne RNA peaks tagama vähemalt kogu pikema ja ei sisalda inhibiitoreid, mis ei sisalda registreerivaid ensüüme, nagu EDTA või SDS.Kvaliteetne...Loe rohkem -
Kuidas tagada qPCR-katsete jaoks mõistlik Ct väärtuste vahemik
Ct väärtus on fluorestsents-kvantitatiivse PCR-i kõige olulisem tulemuste esitamise vorm.Seda kasutatakse geeniekspressiooni erinevuste või geenikoopiate arvu arvutamiseks.Mis on siis fluorestsentsi kvantifitseerimise Ct väärtus, mida peetakse mõistlikuks?Kuidas tagada Ct väärtuse efektiivne vahemik?Mis on Ct...Loe rohkem -
Pöörake tähelepanu järgmistele üksikasjadele, et kahekordistada oma RT-qPCR katse edukust!
RT-qPCR on molekulaarbioloogia põhieksperiment ja kõik peavad sellega tuttavad olema.See hõlmab peamiselt kolme etappi: RNA ekstraheerimine, pöördtranskriptsioon cDNA-ks ja reaalajas fluorestseeruv kvantitatiivne PCR.See ei aita, mis toimub?Tõenäoliselt on probleem selles, et...Loe rohkem -
RNA ekstraheerimisel on 260/230 eriti madal ja pcr-i käivitamise ct väärtus on väga kõrge.Kuidas seda lahendada?
A260/A230 madal suhe on tavaliselt põhjustatud lisanditest, mille maksimaalne neeldumislainepikkus on 230 nm juures.Vaatame, mida need lisandid sisaldavad: Tavalised saasteained Neeldumise lainepikkus Suhe mõju Valk ~230nm ja 280nm Samaaegne A 260 /A 280 ja A 260 /A vähendamine ...Loe rohkem -
Fluorestseeruv kvantitatiivne PCR (qPCR) – praimeri disain
qPCR katsetes on ka praimeri disain väga oluline lüli.See, kas praimerid sobivad või mitte, on tihedalt seotud sellega, kas amplifikatsiooniefektiivsus jõuab standardini, kas amplifitseeritud produktid on spetsiifilised ja kas katsetulemused on kättesaadavad.Niisiis, kuidas teha...Loe rohkem -
Levinud lisandid PCR reaktsioonides ja nende funktsioonid
Usun, et PCR-reaktsioonide tegemisel puutuvad kõik alati kokku selliste või selliste probleemidega, kuid enamiku neist võib liigitada kahte põhiprobleemi: Liiga väike geenimatriitsi võimendamine (amplifikatsioon);Liiga palju mittesihtgeeni amplifikatsiooni.Lisandite kasutamine on üks levinumaid...Loe rohkem -
Kokkuvõte 45 geeniteraapia ravimist, mida on turustatud üle maailma
Geenid on põhilised geneetilised üksused, mis kontrollivad tunnuseid.Välja arvatud mõnede viiruste geenid, mis koosnevad RNA-st, koosnevad enamiku organismide geenid DNA-st.Enamik organismide haigusi on põhjustatud geenide ja keskkonna vastastikusest mõjust.Geeniteraapia võib sisuliselt ravida...Loe rohkem -
Kellest võib RNA-teraapia ajastul saada tööstuse "uus kallis" |Aastane inventuur
Allikas: WuXi AppTec Viimastel aastatel on RNA-teraapia valdkond näidanud plahvatuslikku trendi – ainuüksi viimase 5 aasta jooksul on FDA heaks kiitnud 11 RNA-teraapiat ja see arv ületab isegi varem heakskiidetud RNA-teraapiate summat!Võrreldes traditsiooniliste ravimeetoditega on RNA-teraapial...Loe rohkem -
Nukleiinhape ekstraheeritud!Kuid kas see DNA (RNA) on DNA (RNA), mida te ette kujutasite?
Kui palju sa tead Nukleiinhapete ekstraheerimisest Puhastatud nukleiinhappe algus ja lõpp.Jälg/ultrajälg UV...Loe rohkem -
7 min: 96-süvendilise plaadi rakust RT-qPCR-i
Kui pikk on 7 minutit?See on 420 sekundit.Mida ma saan 7 minutiga teha?See on tass teed, laulu kuulamine;see on tunnis möödumise rõõm, aga ärevus enne eesriide eemaletõmbumist....Loe rohkem