Nukleiinhapete ekstraheerimine on molekulaarbioloogia eksperimentide sissejuhatav oskus.See, kas ta suudab seda oskust omandada ja oskuslikult kasutada, on saanud ka hilisemate eksperimenteerijate jaoks eelduseks eksperimentaalseteks meistriteks.
Erinevate uurimismaterjalide järgi jagunevad katsetajad peamiselt kolme tüüpi:
Loomade eriala, Taimede eriala, Mikrobioloogia eriala
Igat tüüpi katsetajad jätkavad koopiate kopeerimist, et arendada konkreetsete proovide jaoks eksklusiivseid oskusi.
Täna soovib toimetaja katsetajateni tuua mõningaid seadmeid ja rekvisiite, mida kongi kaudu ei saa.Nende abil saate kiiresti uuendada igas suunas.Eksperimentaalseks jumalaks saamine pole unistus.
See number on mõeldud taimeprofessionaalidele eksperimenteerijatele (õppida saavad ka teiste elukutsete katsetajad~).
Usun, et iga eksperimenteerijate põlvkond on kuulnud klassikalistest taimsete nukleiinhapete ekstraheerimise meetoditest, mida nende eelkäijad põlvest põlve edasi andsid.Taimede kaevandamise tööstuse kolm suurt nime.
Kuigi suured poisid on suurepärased, on neil siiski mõned vältimatud puudused.
TRIzol meetod
Kasutatakse sageli ekstraheerimiseks
RNA
●Mürgine ja tülikas
● Sisaldab genoomi saastumist
CTAB meetod
Kasutatakse sageli ekstraheerimiseks
genoomDNA
●Aeganõudev
● CTAB-d on pesemise teel keerulisem eemaldada kui soolast, väike kogus jääke avaldab ensüümi aktiivsusele tohutut mõju
SDS meetod
Kasutatakse sageli ekstraheerimiseks
plasmiid
●Ei sobi kõrge polüsahhariidisisaldusega taimedele
●Valguga saastumine
Selles kaasaegses kahekordse kiirusega värskenduste iteratsioonidega ühiskonnas ei suuda traditsioonilised töömeetodid enam katsetajate vajadusi rahuldada ja seadmete uuendamine on peatselt ees.
Foregene nukleiinhappe ekstraheerimiskomplekti on kümned katsetajad testinud N korda.Seda on lihtne kasutada, see ei kasuta toksilisi reaktiive ega lisa ensüüme.Saadud nukleiinhape on kõrge puhtusastmega, mis on suurepäraste katsetajate igapäevaseks ekstraheerimiseks hädavajalik.
Foregene RNA isolatsioonikomplekt
Siinkohal avaldan katsetajatele ka peidetud toimimistehnika, milleks on taimetüübile vastava ekstraheerimismeetodi valimine (taimetüübi määramise meetod on artikli lõpus!), sest osad taimsed polüsahhariidid ja polüfenoolid on kõrge sisaldusega ning traditsioonilised meetodid on surmavad.Kontrollimiseks ei piisa.
Noh, see on selline...
TRIzoli meetod põlvitas otse kõrge polüsahhariidide ja polüfenoolide (nt banaanilehed, hõlmikpuu lehed ja puuvillalehed) proovide alla.
Selleks on Foregene eksperimenteerijatele välja töötanud kaks tõhusat tööriista.Madala polüsahhariidide ja polüfenoolide ning kõrge polüsahhariidide ja polüfenoolide sisaldusega taimse RNA ekstraheerimiskomplekt suudab vaenlasi sihipäraselt tappa, nii et katsetajad ei karda enam erinevaid taimi.Vahetage lihtsalt varustust otse!
Lisaks ekstraheerimismeetodi uuendamise vajadusele tuleb uuendada ka proovide eeltöötlustoiminguid.
Taimeproovide erilise struktuuri tõttu on osade taimede juuri ja sitkemaid varsi raskem ühtlaseks peenestada ja purustada.
Lihvimistööstuses kasutab lihvimiseks vedelat lämmastikku umbes 80% inimestest, elektrilist lihvimist ja lihvimishelmeste võnkumist aga alla 20%.
Kuigi vedela lämmastikuga jahvatamine on odav ja hõlpsasti kasutatav, on see suure proovinõudlusega katsetajate jaoks õudusunenägu iga kord ja vaeva näha!Kui mörti ei puhastata, põhjustab see proovide vahelist ristsaastumist.
Elektrilise jahvatamise mõju on inimestel erinev ning eksperimenteerijate tegutsemisharjumused mõjutavad nukleiinhappe terviklikkust suuremal määral ning vajadusel on vaja töötada madalal temperatuuril.
seega võib lihvimishelmeste võnkumist pidada praeguseks lihtsaks ja tõhusaks lihvimisseadmeks.
Levinud võnkerežiimid hõlmavad vertikaalset võnkumist, horisontaalset edasi-tagasi võnkumist ja kolmemõõtmelist (horisontaalset võnkumist).Kuid Foregene koepurusti murrab olemasoleva mudeli läbi ja võtab jahvatamise ühtlasemaks muutmiseks kasutusele uue 4D-võnkemeetodi.
Vastab erinevatele näidisnõuetele, lihtne kasutada
Unikaalne 4D purustamise tehnoloogia, purustamise efektiivsus suureneb 20%
Proov on täielikult suletud, ristsaastumine puudub
Vaikne, ≤56 detsibelli
Võrrelge katse tulemusi laine~
Uuritav proov: 50 mg nisulehti (väike polüsahhariidide ja polüfenoolide sisaldus)
Ekstrakti nukleiinhappe tüüp: RNA
Täpikogus: 5μl
Kasutatud ekstraheerimiskomplekt on Foregene Plant Total RNA Extraction Kit (RE-05011)
Võrreldes andmeid ja elektroforeesi graafikut, on näha, et pärast masinjahvatamist ekstraheeritud RNA kontsentratsioon ja puhtus on kõrgem kui vedela lämmastikuga jahvatamisel.Samal ajal, kuna masinjahvatamine võib proovi täielikumalt purustada, saab väikest RNA-d paremini ekstraheerida ja RNA terviklikkust säilitada.
Uuritav proov: 50 mg hõlmikpuu lehti (kõrge polüsahhariidide ja polüfenoolide sisaldus)
Ekstrakti nukleiinhappe tüüp: RNA
Täpikogus: 5μl
Foregene polüsahhariidi polüfenooli taime kogu RNA ekstraheerimise komplekti (RE-05021) kasutamine
Vaadake seda kõrge polüsahhariidide ja polüfenoolide sisaldusega proovide rühma.Mõju on veelgi ilmsem.Sama puhtusega on masinaga jahvatava RNA kontsentratsioon peaaegu 5 korda suurem kui vedela lämmastikuga jahvatamisel ja väike RNA on endiselt nõrgalt nähtav.
Kui tunnete, et ükski ülaltoodud seadmetest pole piisavalt kiire, peab toimetaja välja pakkuma ülima varustuse!
Plant Direct PCR seeria
Selle seadme ainulaadne omadus on see, et taime lehti või seemneid ei pea jahvatama ja purustama ning need visatakse lüüsimiseks otse EP-torusse ning saadud lüüsisegu saab kasutada PCR-reaktsiooni mallina.See on sama lihtne kui üks samm kiiremini!Samal ajal on Foregene Plantsi otsesed PCR-seeriad varustatud UNG saastetõrjesüsteemiga, nii et katsetajad ei muretse enam laboris aerosoolsaaste pärast ja saavad katset hõlpsalt teha.
Kohtuotsuse näpunäited:
Kuidas otsustada, kas tegemist on polüsahhariidpolüfenooli taimega
Võtke umbes 20 mg koeplokk ja asetage see puhtasse 1,5 ml tsentrifuugi katsutisse, lisage 200 ul 200 mM NaOH lahust, asetage see 10 minutiks temperatuurile 95 ℃, jälgige värvimuutust pärast lüüsi
1. Kui lüsaadi värvus on roheline või helekollane, tähendab see, et kudede polüfenoolide sisaldus on madal ja on soovitatav kasutada Foregene Plant sarja
2. Kui lüsaat on pruunikaskollane või pruunikaspunane, tähendab see, et kudede polüfenoolide sisaldus on kõrge ja soovitatav on kasutada Foregene Polysaccharide Polyphenol Plant Plus Series'i.
Postitusaeg: 20. august 2021
