Zebra Fish Direct PCR komplekt-UNG Direct PCR lüüsireagent (sebrakala)
Kirjeldused
See komplekt kasutab ainulaadset lüüsipuhvrisüsteemi, et kiiresti vabastada genoomse DNA sebrakala ja teiste mageveekalade kudedest, sabauimedest või kalamarjaproovidest PCR-reaktsioonide jaoks, seega sobib see eriti hästi suuremahuliseks geneetiliseks testimiseks.Genoomse DNA lüüsipuhvrist vabastamise protsess lõpeb 10-30 minuti jooksul temperatuuril 65 °C.Muid protsesse, nagu valgu ja RNA eemaldamine, pole vaja ning vabanenud DNA jälje saab kasutada PCR-reaktsiooni matriitsina.
2× PCR EasyTM Mix (UNG) kasutab dTTP asemel dUTP-d 2× PCR EasyTM Mixi baasil ja lisab UNG ensüümi (Uracil-N-glükosülaas), mis võib samaaegselt lagundada dUTP-d sisaldavat malli.Enne PCR reaktsiooni kasutatakse UNG ensüümi uratsiili sisaldava PCR produkti lagundamiseks.UNG ensüüm ei mõjuta uratsiili mittesisaldavale mallile, tagades seeläbi amplifikatsiooni spetsiifilisuse ja täpsuse ning takistades suuremahulise geneetilise testimise võimalust.Toimus PCR-produktide saastumine.
D-Taq DNA polümeraas on Foregene poolt spetsiaalselt välja töötatud DNA polümeraas otseste PCR reaktsioonide jaoks.D-Taq DNA polümeraas talub tugevalt mitmesuguseid PCR reaktsiooni inhibiitoreid ja suudab tõhusalt amplifitseerida DNA jälgi erinevates keerukates reaktsioonisüsteemides ning amplifikatsiooni kiirus võib ulatuda 2 Kb/min, mis on eriti sobiv otseseks PCR reaktsiooniks.
Tehnilised andmed
50 × 20 µl rxns, 200 × 20 µl rxns, 500 × 20 µl rxns, 2000 × 20 µl rxns
Komplekti komponendid
I osa | Puhver FP |
Foregene proteaas | |
6 × DNA laadimispuhver | |
II osa | 2 × PCR lihtneTMMix (UNG) |
Juhised |
Omadused ja eelised
■ Ei ole vaja aeganõudvat ja kallist DNA puhastamist.
■ Proovivajadus on väike, testida saab kõigest 1 mg kala sabauime või 10 kalamarja.
■ Spetsiaalseid töötlusi, nagu lihvimine ja purustamine, pole vaja ning toiming on lihtne.
■ Saastevastane PCR-süsteem 2× PCR EasyTM Mix (UNG), mis suudab tõhusalt kõrvaldada PCR-toodete põhjustatud saaste ning tagada võimenduse spetsiifilisuse ja täpsuse.
■ Optimeeritud PCR-süsteem muudab PCR-i spetsiifilisuse ja tugevama taluvuse PCR reaktsiooni inhibiitorite suhtes.
Komplekti parameetrid
Kasutamine: Sebrakalad ja muud mageveekalad.
Proovi lüüsist vabanenud DNA: kasutatakse ainult PCR matriitsina.
Komplekti saab kasutada järgmistel eesmärkidel: transgenoosi tuvastamine, loomade genotüpiseerimine jne.
Töövoog
Ladustamine ja säilivusaeg
Selle komplekti I osa tuleks hoida temperatuuril 2–8 ℃.
Reaktiivi Buffer FP võib kuivades tingimustes säilitada 12 kuud;pikemaks säilitamiseks võib seda säilitada temperatuuril 2-8 ℃.
v Reagendi Foregene Protease on ainulaadne valem.Selle aktiivsuse ja stabiilsuse tagamiseks hoidke seda 12 kuud temperatuuril 4 ℃.
vReagent 6×DNA laadimispuhvrit saab säilitada 4 ℃ või -20 ℃ juures pikka aega.
Selle komplekti II osa tuleks hoida temperatuuril -20 ℃.
vReagent 2×PCR EasyTM Mix(UNG), kui seda kasutatakse sageli, võib seda ka lühiajaliseks säilitamiseks hoida temperatuuril 4 ℃ (kasutatakse ära 10 päeva jooksul).