Viiruse RNA eraldamise komplekt viiruse RNA puhastamiseks plasmast, seerumist ja muudest proovidest
Komplekti kirjeldus:
Kat.nr.RE-02011/02014
Viiruse RNA puhastamiseks plasmast, seerumist, rakuvabadest kehavedelikest, rakukultuuri supernatantidest.
Kiiresti isoleerige ja puhastage viiruse RNA proovidest, nagu plasma, seerum, rakuvabad kehavedelikud ja rakukultuuri supernatandid.
- Pole vaja muretseda RNA lagunemise pärast.Kogu komplekt on RNaasivaba
-Lihtne – kõik toimingud viiakse lõpule toatemperatuuril
-Kiire – toimingu saab lõpetada 20 minutiga
-Kõrge RNA saagis: ainult RNA-d sisaldav kolonn ja ainulaadne valem võivad RNA-d tõhusalt puhastada
- Ohutu – orgaanilist reaktiivi ei kasutata
-Suur proovitöötlusvõimsus – iga kord saab töödelda kuni 200 μl proove.
-Kõrge kvaliteet – puhastatud RNA on väga puhas, valkude ja muude lisanditeta ning sobib erinevatele allavoolu eksperimentaalsetele rakendustele.
Kirjeldused
Komplekt kasutab Foregene välja töötatud tsentrifuugimiskolonni ja valemit, mis suudab tõhusalt ekstraheerida kõrge puhtusastmega ja kvaliteetse viiruse RNA proovidest, nagu plasma, seerum, rakuvaba kehavedelik ja rakukultuuri supernatant.Komplekt sisaldab spetsiaalselt lineaarset akrüülamiidi, mis suudab proovidest hõlpsalt püüda väikeses koguses RNA-d.Ainult RNA-kolonn suudab RNA-d tõhusalt siduda.Komplekt suudab korraga töödelda suurt hulka proove.
Kogu komplekt ei sisalda RNaasi, seega ei lagune puhastatud RNA.Puhver viRW1 ja puhver viRW2 suudavad tagada, et saadud viiruslik nukleiinhape ei sisalda valku, nukleaasi ega muid lisandeid, mida saab kasutada otse allavoolu molekulaarbioloogia katseteks.
Tehnilised andmed
50 ettevalmistust, 200 ettevalmistust
Komplekti komponendid
| Lineaarne akrüülamiid |
| Puhver viRL |
| Puhver viRW1, puhver viRW2 |
| RNaasivaba ddH2O |
| Ainult RNA-d sisaldav veerg |
| Juhised |
Omadused ja eelised
- Pole vaja muretseda RNA lagunemise pärast.Kogu komplekt on RNaasivaba
-Lihtne – kõik toimingud viiakse lõpule toatemperatuuril
-Kiire – toimingu saab lõpetada 20 minutiga
-Kõrge RNA saagis: ainult RNA-d sisaldav kolonn ja ainulaadne valem võivad RNA-d tõhusalt puhastada
- Ohutu – orgaanilist reaktiivi ei kasutata
-Suur proovitöötlusvõimsus – iga kord saab töödelda kuni 200 μl proove.
-Kõrge kvaliteet – puhastatud RNA on väga puhas, valkude ja muude lisanditeta ning sobib erinevatele allavoolu eksperimentaalsetele rakendustele.
Komplekti parameetrid
Komplekti rakendus:
See sobib viiruse RNA ekstraheerimiseks ja puhastamiseks proovidest, nagu plasma, seerum, rakuvaba kehavedelik ja rakukultuuri supernatant.
Töövoog
Säilitamistingimused
- Komplekti saab hoida 24 kuud toatemperatuuril (15-25 ℃) või 2-8 ℃ kauem.
-Lineaarset akrüülamiidi lahust võib hoida toatemperatuuril 7 päeva.Pärast komplekti kättesaamist võtke lineaarne akrüülamiidi lahus välja ja hoidke seda temperatuuril -20 ℃.
-Pärast lineaarse akrüülamiidi lisamist puhvrile viRL võib seda hoida temperatuuril 2–8 ℃ kuni 48 tundi.Kasutage värskelt valmistatud lahust.
Juhised probleemide analüüsimiseks
The following is an analysis of the problems that might be encountered in the extraction of viral RNA. We wish it would be helpful to your experiment. In addition, for other experimental or technical problems other than operating instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. Contact us if you need at : 028-83361257or E-mail：Tech@foregene.com。
RNA-d ei saa ekstraheerida või nukleiinhappe saagis on madal
Taaskasutamise tõhusust mõjutavad tavaliselt paljud tegurid, näiteks: proovi RNA sisaldus, töömeetod, elueerimismaht jne.
Tavaliste põhjuste analüüs:
1.Jäävannis või madalal temperatuuril (4 °C) tsentrifuugimine töötamise ajal.
Soovitus: Toatemperatuuril (15-25 °C) töötamine, mitte kunagi jäävanni ja madala temperatuuriga tsentrifuugi kasutamine.
2. Proovide ebaõige säilitamine või liiga kauaaegne proovide säilitamine.
Soovitus: hoida proove temperatuuril -80 °C või külmutada vedelas lämmastikus ning vältida korduvat külmutamist-sulatamist;proovige RNA ekstraheerimiseks kasutada värskelt kogutud proove.
3. Ebapiisav proovi lüüs
Soovitus: veenduge, et proov ja töölahus (lineaarne akrüülamiid) on põhjalikult segatud ja inkubeeritud 10 minutit toatemperatuuril (15-25 °C).
4.Eluent lisati valesti
Soovitus: veenduge, et puhastuskolonni membraani keskele oleks lisatud RNaasivaba ddH2O
5. Vale kogus veevaba etanooli puhvris viRW2
Soovitus: järgige juhiseid, lisage puhvrile viRW2 õige kogus veevaba etanooli ja segage need enne komplekti kasutamist korralikult läbi.
6. Näidise vale kasutamine.
Soovitus: 200 µl proovi 500 µl puhvri viRL kohta.Liigne proovimaht vähendab RNA ekstraheerimise kiirust.
7.Vale elueerimismaht või mittetäielik elueerimine.
Soovitus: Puhastuskolonni eluendi maht on 30-50μl;kui elueerimisefekt ei ole rahuldav, on soovitatav lisada eelsoojendatud RNaasivaba ddH2O ja pikendage toatemperatuurile asetamise aega, näiteks 5-10 min
8. Puhastuskolonnis on pärast loputamist puhvris viRW2 etanooli jääk.
Soovitus: Kui pärast loputamist puhvris viRW2 ja tsentrifuugimist tühjas katsutis 2 minuti jooksul jääb etanooli alles, võib puhastuskolonni pärast tühjas katseklaasis tsentrifuugimist jätta toatemperatuurile 5 minutiks, et eemaldada täielikult järelejäänud etanool.
Puhastatud RNA molekulide lagunemine
Puhastatud RNA kvaliteet on seotud selliste teguritega nagu proovide säilitamine, RNaasi saastumine ja toimimine.
Tavaliste põhjuste analüüs:
1.Kogutud proove ei salvestatud õigeaegselt.
Soovitus: kui proovi ei kasutata õigeaegselt pärast kogumist, hoidke seda kohe temperatuuril -80 ℃ või vedelas lämmastikus.RNA molekulide ekstraheerimiseks proovige võimalusel kasutada värskelt kogutud proove.
2. Kogutud proove külmutati ja sulatati korduvalt.
Soovitus: Vältige korduvat külmutamist ja sulatamist (mitte rohkem kui üks kord) proovi kogumise ja säilitamise ajal, vastasel juhul väheneb nukleiinhappe saagis.
3. Operatsioonisaalis võeti kasutusele RNaasi või ei kantud ühekordseid kindaid, maske jms.
Soovitus: RNA molekulide ekstraheerimise katset on kõige parem teha eraldi RNA operatsiooniruumis ja katselaud puhastatakse enne katset.Katse ajal kandke ühekordselt kasutatavaid kindaid ja maske, et vältida RNaasi sissetoomisest põhjustatud RNA lagunemist.
4. Reaktiiv on kasutamise ajal saastunud RNaasiga.
Soovitus: Asendage seotud katsete jaoks uue viiruse RNA isolatsioonikomplektiga.
5. Tsentrifuugitorude, pipetiotsikute jne RNaasi saastumine. Soovitus: Veenduge, et tsentrifuugitorud, pipetiotsad ja pipetid on kõik RNaasivabad.
Puhastatud RNA molekulid mõjutasid allavoolu katseid
Puhastuskolonnis puhastatud RNA molekulid mõjutavad allavoolu katseid, kui soolaioone või valke on liiga palju, näiteks: pöördtranskriptsioon, Northern Blot jne.
1.Elueeritud RNA molekulides on allesjäänud soolaioone.
Soovitus: Veenduge, et puhvrile viRW2 on lisatud õige kogus veevaba etanooli, ja peske puhastuskolonni kaks korda vastavalt kasutusjuhendis toodud õigele tsentrifuugimiskiirusele. Kui soolaioone on veel alles, võite puhastuskolonnile lisada puhvrit viRW2 ja jätta selle 5 minutiks toatemperatuurile.Seejärel teostage tsentrifuugimine, et eemaldada soolaioonidega saastumine suurimal määral
2.Elueeritud RNA molekulides on järelejäänud etanooli
Soovitus: kui olete veendunud, et puhastuskolonnid on puhvriga viRW2 loputatud, viige läbi tühja toru tsentrifuugimine vastavalt kasutusjuhendis toodud tsentrifugaalkiirusele.Kui etanooli on veel alles, võib selle pärast tühjas katseklaasis tsentrifuugimist jätta toatemperatuurile 5 minutiks, et eemaldada kõige rohkem järelejäänud etanooli.
Kasutusjuhendid:
Viiruse RNA isolatsioonikomplekti kasutusjuhend
