Sissejuhatus:

RNA molekulid võivad ulatuslikult suhelda teiste bioloogiliste molekulidega, nagu valk, DNA ja RNA, ning eksisteerida seega rakkudes ja organismides makromolekulaarsete komplekside kujul.Nende hulgas on RNA-valgu kompleksid RNA olemasolu ja toimimine Üks olulisi vorme.RNA tõmbamine on klassikaline meetod RNA molekulide, eriti lncRNA molekulide interakteeruvate valkude skriinimiseks ja tuvastamiseks ning seda tunnustavad enamik teadlasi ja rahvusvahelisi autoriteetseid akadeemilisi ajakirju.Täna jagab FORREGENE teiega RNA tõmbamise eksperimentaalset põhimõtet ja tehnilist protsessi, võib-olla saate seda kasutada

1. RNA tõmbamistehnoloogia eksperimentaalne põhimõte:

Biotiiniga märgistatud sihtmärk-lncRNA või lncRNA fragmentide (sealhulgas positiivsete ja negatiivsete kontrollidena kasutatavate RNA fragmentide) in vitro transkriptsioon ja süntees ning inkubeerimine rakuekstraktidega;kasutage RNA-valgu või RNA-RNA komplekside kogumiseks avidiiniga ankurdatud magnethelmeid. Pärast põhjalikku pesemist kompleks elueeritakse.Kui tuvastate valgu sihtmolekuli, mis interakteerub lncRNA-ga, tehke RNA-pull-down produktile valgu elektroforees, tuvastage sihtvalk hõbedaga värvimisega ja lõigake geel massispektromeetria jaoks;teostama ka otse western blot verifitseerimist rippmenüü tootele;kui tuvastatakse RNA sihtmolekulide puhul, mis interakteeruvad lncRNA-ga, ekstraheeritakse RNA-pull-down produktid RNA-d ja tehakse spetsiifiline qRT-PCR tuvastamine.

2. RNA tõmbamistehnoloogia katseprotsess:

3. FOREGENE'i RNA eemaldamise tehniline teenus:

Rakukultuur

Raku kogu/tuuma/plasmavalgu ekstrakti valmistamine

RNA tõmbamise eksperiment

SDS-PAGE elektroforees, hõbedane peits

Massispektromeetria ja WB katsed

Eksperimentaalne aruanne

4. Eksperimentaalne juhtum

Järgmisel joonisel on näidatud FJ Bio-Bio RNA tõmbamise ja SDS-PAGE elektroforeesi tuvastamise tulemused, milles punane nool tähistab erinevuse riba:

Sichuani ülikooli professor Song Xu uurimisrühm on kogunud 15 aastat pikaajalist akumulatsiooni lncRNA uurimise valdkonnas.Foregene Bio ja professor Song Xu uurimisrühm tegid koostööd lncRNA RNA tõmbamistehnoloogia käivitamiseks, mis annab teile teie katse jaoks rahuldava tulemuse.