• facebook
  • linkedin
  • Youtube

Patogeensed mikroorganismid on mikroorganismid, mis võivad tungida inimkehasse, põhjustada infektsioone ja isegi nakkushaigusi või patogeene.Patogeenidest on kõige kahjulikumad bakterid ja viirused.

Infektsioon on inimeste haigestumuse ja surma üks peamisi põhjuseid.20. sajandi alguses muutis antimikroobsete ravimite avastamine kaasaegset meditsiini, andes inimestele "relva" infektsioonide vastu võitlemiseks ning muutes võimalikuks ka operatsioonid, elundite siirdamise ja vähiravi.Nakkushaigusi põhjustavaid patogeene on aga mitut tüüpi, sealhulgas viirused, bakterid, seened ja muud mikroorganismid.Et parandada erinevate haiguste diagnoosimist ja ravi ning kaitsta inimeste tervist

Tervis nõuab täpsemaid ja kiiremaid kliinilisi testimise meetodeid.Millised on mikrobioloogilise avastamise tehnoloogiad?

01 Traditsiooniline tuvastamismeetod

Traditsioonilise patogeensete mikroorganismide tuvastamise protsessis tuleb enamik neist värvida, kultiveerida ja selle alusel tehakse bioloogiline identifitseerimine, et saaks tuvastada erinevat tüüpi mikroorganisme ja avastamisväärtus oleks kõrge.Traditsioonilised tuvastamismeetodid hõlmavad peamiselt äigemikroskoopiat, eralduskultuuri ja biokeemilist reaktsiooni ning koerakkude kultuuri.

1 Smear mikroskoopia

Patogeensed mikroorganismid on väikese suurusega ja enamik neist on värvitud ja poolläbipaistvad.Pärast nende värvimist saab nende abil mikroskoobi abil jälgida nende suurust, kuju, paigutust jne.Otsene määrdumismikroskoopiline uuring on lihtne ja kiire ning on varajaseks eeldiagnoosimiseks kasutatav ka nende erivormidega patogeensete mikroobsete infektsioonide puhul, nagu gonokokkinfektsioon, Mycobacterium tuberculosis, spirohetaalinfektsioon jne.Otsese fotomikroskoopilise uurimise meetod on kiirem ja seda saab kasutada patogeenide visuaalseks kontrollimiseks erivormidega.See ei nõua spetsiaalseid instrumente ja seadmeid.See on endiselt väga oluline vahend patogeensete mikroorganismide tuvastamiseks põhilaborites.

2 Eralduskultuur ja biokeemiline reaktsioon

Eralduskultuuri kasutatakse peamiselt siis, kui baktereid on palju ja üks neist tuleb eraldada.Enamasti kasutatakse seda rögas, väljaheites, veres, kehavedelikes jne. Kuna bakterid kasvavad ja paljunevad pikka aega, nõuab see katsemeetod teatud aja., Ja seda ei saa partiidena töödelda, seetõttu on meditsiinivaldkond jätkanud sellealast uurimistööd, kasutades traditsiooniliste koolitusmeetodite täiustamiseks ja tuvastamise täpsuse parandamiseks automatiseeritud koolitus- ja identifitseerimisseadmeid.

3 Koerakkude kultuur

Kuderakkude hulka kuuluvad peamiselt klamüüdia, viirused ja riketsiad.Kuna erinevate patogeenide koerakkude tüübid on erinevad, tuleb pärast kudede eemaldamist patogeensetest mikroorganismidest elusrakke kasvatada subkultuuri teel.Kultiveeritud patogeensed mikroorganismid inokuleeritakse koerakkudesse kultiveerimiseks, et vähendada rakkude patoloogilisi muutusi nii palju kui võimalik.Lisaks saab koerakkude kultiveerimise käigus tundlikele loomadele otse nakatada patogeenseid mikroorganisme ning seejärel testida patogeenide omadusi vastavalt muutustele loomade kudedes ja elundites.

02 Geneetilise testimise tehnoloogia

Meditsiinitehnoloogia taseme pideva paranemisega maailmas on molekulaarbioloogilise tuvastamise tehnoloogia areng ja edenemine, mis võimaldab tõhusalt tuvastada patogeenseid mikroorganisme, parandada ka väliste morfoloogiliste ja füsioloogiliste omaduste rakendamise hetkeseisu traditsioonilises tuvastamisprotsessis ning kasutada ainulaadseid geene. Fragmendijärjestus tuvastab oma ainulaadsed patogeensete mikroorganismide tüübid, seega on kliinilise testimise tehnoloogia laialdane geenitestimise tehnoloogia.

1 polümeraasi ahelreaktsioon (PCR)

Polümeraasi ahelreaktsioon (Polymerase Chain Reaction, PCR) on tehnika, mis kasutab tuntud oligonukleotiidpraimereid, et suunata ja amplifitseerida väikest kogust geenifragmenti, mida testitakse tundmatus fragmendis in vitro.Kuna PCR suudab testitavat geeni amplifitseerida, sobib see eriti hästi patogeense infektsiooni varajaseks diagnoosimiseks, kuid kui praimerid pole spetsiifilised, võib see põhjustada valepositiivseid tulemusi.PCR-tehnoloogia on viimase 20 aasta jooksul kiiresti arenenud ning selle töökindlus on järk-järgult paranenud alates geenide amplifikatsioonist kuni geenide kloonimise ja transformeerimise ning geneetilise analüüsini.See meetod on ka peamine uue koroonaviiruse tuvastamise meetod selles epideemias.

Foregene on välja töötanud Direct PCR tehnoloogial põhineva RT-PCR komplekti, mis võimaldab tuvastada 2 normaalset geeni, 3 geeni ja variante Ühendkuningriigist, Brasiiliast, Lõuna-Aafrikast ja Indiast, vastavalt B.1.1.7 liini (UK), B.1.351 liini (ZA), B.1.617 liini (IND) ja P.1 liini (BR).

2 Geenikiibi tehnoloogia

Geenikiibi tehnoloogia viitab mikrokiibi tehnoloogia kasutamisele suure tihedusega DNA fragmentide kinnitamiseks tahketele pindadele, nagu membraanid ja klaaslehed, kindlas järjekorras või paigutuses kiire robootika või in situ sünteesi abil.Isotoopide või fluorestsentsiga märgistatud DNA-sondidega ja aluste komplementaarse hübridisatsiooni põhimõtte abil on läbi viidud suur hulk uurimismeetodeid, nagu geeniekspressioon ja monitooring.Geenikiibi tehnoloogia rakendamine patogeensete mikroorganismide diagnoosimisel võib diagnoosimise aega oluliselt lühendada.Samal ajal saab see tuvastada ka seda, kas patogeenil on ravimiresistentsus, millised ravimid on resistentsed ja millised ravimid on tundlikud, et pakkuda kliinilisi ravimeid.Selle tehnoloogia tootmiskulud on aga suhteliselt kõrged ja kiibi tuvastamise tundlikkust tuleb parandada.Seetõttu kasutatakse seda tehnoloogiat endiselt laboriuuringutes ja seda pole kliinilises praktikas laialdaselt kasutatud.

3 Nukleiinhapete hübridisatsiooni tehnoloogia

Nukleiinhapete hübridisatsioon on protsess, mille käigus patogeensete mikroorganismide komplementaarsete järjestustega nukleotiidide üksikud ahelad sulanduvad rakkudes, moodustades heteroduplekse.Hübridisatsiooni põhjustav tegur on nukleiinhappe ja sondide vaheline keemiline reaktsioon patogeensete mikroorganismide tuvastamiseks.Praegu hõlmavad patogeensete mikroorganismide tuvastamiseks kasutatavad nukleiinhapete kordusristimise meetodid peamiselt nukleiinhapete in situ hübridisatsiooni ja membraani blot-hübridisatsiooni.Nukleiinhapete in situ hübridisatsioon viitab nukleiinhapete hübridiseerimisele patogeenirakkudes märgistatud sondidega.Membraanblot-hübridisatsioon tähendab, et pärast seda, kui eksperimenteerija eraldab patogeenraku nukleiinhappe, puhastatakse see ja kombineeritakse tahke kandjaga ning seejärel hübridiseeritakse arvestussondiga.Arvestusliku hübridisatsioonitehnoloogia eelisteks on mugav ja kiire töö ning see sobib tundlikele ja sihikindlatele patogeensetele mikroorganismidele.

03 Seroloogiline testimine

Seroloogiline uuring võimaldab kiiresti tuvastada patogeensed mikroorganismid.Seroloogilise testimise tehnoloogia põhiprintsiip on patogeenide tuvastamine tuntud patogeeni antigeenide ja antikehade kaudu.Võrreldes traditsioonilise rakkude eraldamise ja kultiveerimisega on seroloogilise testimise etapid lihtsad.Tavaliselt kasutatavad tuvastamismeetodid hõlmavad lateksi aglutinatsiooni testi ja ensüümiga seotud immuunanalüüsi tehnoloogiat.Ensüümiga seotud immuunanalüüsi tehnoloogia rakendamine võib oluliselt parandada seroloogiliste testide tundlikkust ja spetsiifilisust.See ei suuda tuvastada mitte ainult uuritavas proovis olevat antigeeni, vaid tuvastada ka antikeha komponenti.

Septembris 2020 andis Ameerika nakkushaiguste selts (IDSA) välja suunised COVID-19 diagnoosimiseks seroloogiliste testide tegemiseks.

04 Immunoloogiline testimine

Immunoloogilist tuvastamist nimetatakse ka immunomagnetiliste helmeste eraldamise tehnoloogiaks.Selle tehnoloogia abil saab patogeenides eraldada patogeensed ja mittepatogeensed bakterid.Põhiprintsiip on: magnethelmeste mikrosfääride kasutamine ühe antigeeni või mitut tüüpi spetsiifiliste patogeenide eraldamiseks.Antigeenid pannakse kokku ja patogeensed bakterid eraldatakse patogeenidest antigeenikeha ja välise magnetvälja reaktsiooni kaudu.

Patogeenide tuvastamise levialad-hingamisteede patogeenide tuvastamine

Foregene “15 hingamisteede patogeensete bakterite tuvastamise komplekt” on väljatöötamisel.Komplekt suudab tuvastada rögas 15 tüüpi patogeenseid baktereid, ilma et oleks vaja puhastada rögas leiduvat nukleiinhapet.Tõhususe osas lühendab see esialgset 3–5 päeva 1,5 tunnini.


Postitusaeg: 20. juuni 2021